细胞培养中细胞生长缓慢-问题分析
点击次数:1213 更新时间:2013-07-30
细胞培养中细胞生长缓慢-问题分析
就一个实验室来说,无论它运作多么好,总会因为招募新人、革新技术或拓展方向而影响原来的流程,从而产生各种各样的新问题。解决这些问题的一个方法就是确保原先操作规程不发生任何变化,即规范标准操作程序(SOPs),且不经严格*地考证后不轻易改变SOPs。然而,这样做往往非常困难,特别是针对科学研究。科学本身的生命力就在于不断变革研究内容,拓展研究领域,更新研究方法。
当细胞生长缓慢时,先确定实验室中只有你个人培养体系有这种问题,还是其他研究人员也遇到同样的问题?
如果此问题只发生在你的培养基体系,检查你所培养的细胞是否存在污染。检查你用于培养细胞的培养基和血清(如是否批次不同或厂商不同)。如果你平常使用的是粉剂或10*储存液,而现在购买的培养基更换为1*液体,而随后证明问题就出现在此,处理方法参见关于培养基的部分。
如果问题与培养基无关,那么很可能还是细胞的问题。
如果问题出在你所培养细胞的本身,复苏另一支冻存的细胞,并且与正在培养的细胞加以比较。两种细胞的培养应分开,以免在培养之初就产生污染。随后做如下检查:细胞保藏制度-计数传代培养的细胞,并绘制生长曲线,与以前培养该细胞的资料进行比较,检查是否有下列因素:传代时是否接种密度过低;细胞传代是否过于频繁;传代平台期是否过长。
(来源: 英 弗雷谢尼 《动物细胞培养基本技术指南》 细胞生长缓慢 拜力生物编辑整理)